Reguladores de crescimento vegetal no cultivo in vitro de Mentha x Piperita L / Plant growth regulators on in vitro culture of Mentha x piperita L

A micropropagação é uma técnica muitas vezes indicada para a multiplicação em larga escala de plantas com propriedades medicinais. Dentre elas, destaca-se a hortelã-pimenta (Mentha x Piperita L.), cujo óleo essencial é utilizado no tratamento de transtornos digestivos e respiratórios. Para otimizar o protocolo de micropropagação dessa espécie são necessários estudos, principalmente quanto à suplementação do meio de cultura para garantir a produção massal in vitro e posterior extração do óleo essencial. Nesse contexto, objetivou-se avaliar o efeito de concentrações e combinações de reguladores de crescimento vegetal na morfogênese in vitro de hortelã-pimenta. Segmentos nodais provenientes de plântulas estabelecidas in vitro foram utilizados como fonte de explante e inoculados em meio de cultura MS suplementado com 0; 2,0 e 4,0 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina), 0; 0,5 e 1,5 mg L-1 de ANA (ácido naftaleno-acético) e 0; 0,5 e 1,0 mg L-1 de GA3 (ácido giberélico). O delineamento experimental adotado foi inteiramente casualizado, com os tratamentos distribuídos em esquema fatorial 3x3x3 com oito repetições. Concluiu-se que o BAP favoreceu a sobrevivência de segmentos nodais de M. x Piperita inoculados in vitro e, quando combinado ao GA3, promoveu a brotação dos explantes. Essas características, no entanto, não foram estimuladas pela adição de ANA ao meio de cultura. Conclui-se que após a multiplicação dos brotos in vitro estes devem ser transferidos para meio sem reguladores para seu desenvolvimento. Apesar dos efeitos benéficos do BAP na organogênese de M. x Piperita, elevadas concentrações deste regulador de crescimento vegetal promoveram a formação de calos.

Micropropagation is a technique used for the large-scale production of medicinal plants. Among them, peppermint (Mentha x piperita L.) may be mentioned because of the pharmacological importance of its essential oil, which is used on the treatment of digestive and respiratory disorders. Studies are needed in order to optimize the micropropagation protocol of this species, especially concerning the culture medium, to ensure the in vitro mass clonal production and to enable the future extraction of the plant essential oil. Therefore, this work aimed to evaluate the effects of concentrations and combinations of different plant growth regulators on the in vitro morphogenesis of peppermint. Nodal segments from plantlets already established in vitro were used as explants and inoculated on MS medium supplemented with 0, 2.0 and 4.0 mg L-1 of BAP (6-benzylaminopurine), 0, 0.5 and 1.5 mg L-1 of NAA (naphthalene acetic acid) and 0; 0.5 and 1.0 mg L-1 of GA3 (gibberellic acid). The experiment was in a completely randomized design, set up as a 3x3x3 factorial design with eight replicates. We concluded that BAP increases the survival rate of in vitro inoculated nodal segments of M. x piperita. In addition, its combination with GA3 stimulates explants shooting. Those aspects, however, are not promoted by the addition of NAA into the culture medium. Also, the results indicate that, after in vitro multiplication, peppermint shoots must be transferred to another medium without plant growth regulators for shoot elongation. High concentrations of BAP promote calli induction, despite having beneficial effects on the organogenesis of M. piperita.

Citocininas na multiplicação in vitro de hortelã-pimenta (Mentha x Piperita L. ) / Cytokinins on in vitro multiplication of peppermint (Mentha x Piperita L. )

O hortelã-pimenta é um hibrido triplo, Mentha x piperita, utilizado de forma medicinal no tratamento de náuseas, cólicas gastrointestinais, flatulências, cálculos biliares, icterícia, ansiedade, expectoração e expulsão de vermes intestinais. Na micropropagação, o BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (cinetina) têm sido as fontes de citocininas mais empregadas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de reguladores vegetais na multiplicação in vitro de hortelã-pimenta. Explantes constituídos de segmentos nodais provenientes de plântulas já estabelecidas in vitro com aproximadamente 0,5 cm foram inoculados em meio MS, suplementado com diferentes associações de BAP e KIN, em adição de 30 g L-1 de sacarose. As concentrações de citocininas utilizadas foram 0,0; 1,0 e 2,0 mg L-1 de BAP e 0,0; 0,5 e 1,0 mg L-1 de KIN. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com nove tratamentos consistindo de cinco frascos cada um, sendo que cada frasco continha quatro explantes. A utilização de 2,0 mg L-1 de BAP promove a multiplicação in vitro de hortelã-pimenta, porém, diminui o índice de sobrevivência. O uso de citocininas aumenta a massa fresca e seca dos explantes e a ausência destes reguladores propicia o alongamento nesta espécie.

Peppermint is used for medical treatments of nausea, gastrointestinal cramps, flatulence, gallstones, jaundice, anxiety, sputum and expulsion of intestinal worms. In micropropagation, BAP (6-benzylaminopurine) and KIN (kinetin) have been the most widely used sources of cytokinins. The aim of this study was to evaluate the effect of plant growth regulators in multiplication of peppermint. Explants consisting of nodal segments from seedlings already established in vitro with approximately 0,5 cm were inoculated on MS medium supplemented with different combinations of BAP and KIN and 30 g L-1 of sucrose. The concentrations of cytokinins used were 0,0; 1,0 and 2,0 mg L-1 of BAP and 0,0; 0,5 and 1,0 mg L-1 of KIN. The experiment was set up in a completely randomized design with nine treatments consisting of five bottles each, and each vial contained four explants. The use of 2,0 mg L-1 of BAP promotes the in vitro multiplication of peppermint, but decreases the survival rate. Cytokinins increase fresh and dry weight of explants and the absence of these regulators provides the elongation in this specie.